Chimie · l'expérience
Démasque la fausse coopérativité
Une streptavidine est pleine quand ses quatre sites portent une biotine. Remplis la moitié des streptavidines dans les règles, puis découvre comment une goutte trop petite fabrique une coopérativité qui n'existe pas.
1 · Quatre sites indépendants
Débutant
Si les quatre sites sont indépendants, comment monte la part de streptavidines pleines, avec leurs quatre biotines, quand on ajoute de la biotine ?
Ajoute de la biotine diluée, bien mélangée, jusqu'à ce que la moitié des streptavidines soient pleines.
2 · Plus vite que le mélange
Intermédiaire
Une goutte réagit dans une sphère de rayon 1,5 R + 1 mm, où R est le rayon de la goutte. Une goutte de 4 µL a un rayon d'environ 1 mm. Quel est le rayon de sa zone de réaction ?
Toujours 1,2 biotine par protéine, mais plus ou moins diluée : change le volume de la goutte et trouve celui qui donne le plus de streptavidines pleines.
3 · La biotine à 25 µM
Expert
Biotine à 25 µM, en gouttes de quelques microlitres. D'après la carte de l'article, à quels rapports biotine/streptavidine les petites gouttes multiplient-elles le plus le nombre de protéines pleines, par rapport à un bon mélange ?
4 · La bonne dilution
Expert
Tu veux 0,5 biotine par streptavidine, dans 200 µL à 200 nM, sans artefact : la goutte doit faire au moins 15 % du volume. Quelle concentration de biotine au plus dans la solution à pipeter ?
Illusion démasquée
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